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供应ECL Plus 超敏发光液
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产品: 浏览次数:786供应ECL Plus 超敏发光液 
品牌: solarbio
产品型号: PE0010
单价: 面议
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发货期限: 自买家付款之日起 1 天内发货
有效期至: 长期有效
最后更新: 2019-01-22 10:17
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详细信息

货号:PE0010
规格:25ml/100ml
保存:4℃密封避光保存有效期一年以上。25℃室温放置数月不影响质量。
产品简介:
ECL Plus 超敏发光液直接或间接检测与辣根过氧化物酶HRP关联的蛋白或核酸底物。这一独特的发光底物系统是目前灵敏的商业化荧光ECL检测试剂,具有极高灵敏度和高信噪比,可检测出10-100 fg的微量抗原;发光迅速,荧光可使X感光胶片感光达12小时以上,特别适用于痕量蛋白或核酸检测。同时该试剂允许使用更高的抗体稀释倍数,(1:2000-1:10000),极其节省抗体。 用途:用于HRP标记抗体的Western Blot和HRP标记探针的核酸杂交。 安全性:无特殊毒性,按普通化学品处理。
使用方法: 1、常规电泳、转膜、HRP标记抗体或核酸探针孵育、洗膜。注意用HRP标记IgG或用一抗-链亲和素-生物素-HRP夹心法。核酸杂交膜用HRP标记探针杂交,洗膜。 2、在洗涤膜上的HRP标记二抗的同时,新鲜配制发光工作液:分别取等体积的溶液A和B混合,放置使之升到室温否则会减弱荧光强度。建议立即使用工作液,室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有减低。 3、用镊子取出膜,搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜完全干燥。将膜完全浸入并与发光工作液(0.125ml发光工作液/cm2膜)充分接触。室温孵育3分钟后立即压片曝光。孵育时间过长不会增加灵敏度,有时还会导致曝光条带异常。发光过程的本质是酶促反应,使用过少的发光工作液不利于反应进行,也会导致膜上条带曝光不均匀和灵敏度明显降低。为达节约目的可将膜减小但勿降低发光液用量。 4、用镊子夹起膜,搭在滤纸上沥干发光工作液。但勿洗去发光液。 5、在X光胶片暗盒内面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将杂交膜贴在保鲜膜上,将保鲜膜折起来完全包裹杂交膜,去除气泡和皱褶,可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖杂交膜的保鲜膜固定在暗盒内,蛋白带面向上。 6、在黑暗中放入X感光胶片,分别曝光不同的时间如数秒到数分钟。显影冲洗。
注意事项: 1、步骤1-5可在日光灯下操作;但发光液暴露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低,移到暗房操作可避免。戴手套可以避免在膜上留下手印,保持膜的洁净。 2、长时间曝光或蛋白质过量,将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。曝光不足则条带模糊。 3、发光工作液孵育约3分钟后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见,低丰度蛋白条带发光较弱,肉眼虽不可见但能使X胶片曝光。不能单凭肉眼观察判断条带发光时间。肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使X胶片感光,因而弱带可曝光1-10小时。如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用ECL发光和曝光。 4、由于超敏发光液的高灵敏度,强烈推荐大多数进口抗体起始浓度为一抗1:1000-1:4000,二抗1:2000-1:5000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带,导致失败!
5、某些市售保鲜膜包裹印迹膜时会淬灭荧光,应选择高质量保鲜膜,例如“克林莱”牌保鲜膜。 6、使用肉眼可见的预染色蛋白Marker和荧光-放射自显影曝光标签可帮助确定胶片上条带的准确位置和大小。 7、NaN3能抑制HRP活性,回收二抗时应避免使用NaN3,如必需使用勿超过0.01%。

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产品编号 产品名称 规格 价格
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